Cultivar los explantes en una
cámara de transferencia con aire estéril («gabinete de flujo laminar»), localizada en un ambiente
limpio y no expuesta a corrientes de
aire. De no disponer este equipamiento, se pueden sustituir con cuartos esterilizados previamente con luz ultravioleta (nunca exponerse a la
luz UV en forma directa). La mesada de
trabajo y las paredes del gabinete deben
ser desinfectadas previamente con etanol
al 70%. De la misma manera deben ser
desinfectados exteriormente todos los
recipientes (conteniendo medios de cultivo, agua, etc.) que ingresen en el área del aire estéril. Los operarios
constituyen frecuentemente una importante fuente primaria de contaminación,
porque es recomendable que, antes de comenzar a trabajar laven sus manos y antebrazos con abundante agua y jabón y se
des infecten con etanol al 70 %. La
utilización de guardapolvos, guantes y máscaras protectoras de la boca y
de la nariz, así como los gorros protectores
de los cabellos, ayudan a reducir sensiblemente los niveles de contaminación. Los instrumentos de trabajo
(pinzas, pipetas, tijeras, agujas, cápsulas de Petri) deben ser esterilizados antes de su uso.
Muchos de estos instrumentos pueden ser
colocados en etanol al 95% y, antes de
ser usados, se deben flamear
cuidadosamente en la llama de un
mechero. También es necesario flamear la
boca de los recipientes que contienen
los medios de cultivo antes y después
de cultivar el explante. Incubar los cultivos en cámaras o cuartos de cultivo, cerrados, libres de corrientes de
aire y bien higienizados. En lo posible se debe restringir la circulación de
personas, y los recipientes con cultivos
contaminados deben ser rápidamente
eliminados de este sector. Es conveniente
que antes del lavado, estos cultivos
sean esterilizados.
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