La correcta elección y
preparación del explanto incide directamente sobre la calidad del mismo y su
respuesta frente a los dos principales problemas que afectan al establecimiento
del cultivo, que son la contaminación con microorganismos y la oxidación del
explanto. Los factores que influyen sobre la calidad del explanto son: el tipo de órgano que sirve como
explanto, la edad ontogénica y fisiológica del mismo, la estación en la cual se
colecta el material vegetal, el tamaño y el estado sanitario general de la
planta donante.
La planta donante debe
elegirse en base a una selección masal positiva para las características
agronómicas deseables. Una vez seleccionados los individuos, es preciso definir
el tipo de explanto a establecer en condiciones in vitro. En general, los
órganos jóvenes o bien rejuvenecidos son los que tienen mejor respuesta en el
establecimiento que los obtenidos a partir de materiales adultos. El empleo de
explantos que se encuentran expuestos a bajos niveles de patógenos puede resolver
el problema de la contaminación por hongos y bacterias durante el
establecimiento del cultivo in vitro. Se recomienda colectar explantos
primarios a campo durante la estación primaveral y estival, cuando existe una
brotación activa de las yemas, ya que el empleo de yemas en estado de dormición
ocasiona serios problemas de contaminación. A fin de lograr explantos de
óptima calidad es conveniente hacer crecer las plantas donantes por un tiempo
mínimo en condiciones de invernáculo. De esta forma es posible incidir directamente
sobre el estado sanitario y la calidad de los explantos mediante el control de
la intensidad lumínica, temperatura y reguladores de crecimiento. Para especies
ornamentales tropicales y subtropicales se recomienda mantener las plantas
donantes en condiciones de alta temperatura (25ºC) y baja humedad relativa
(75%) a fin de reducir la proliferación de patógenos
Los procesos morfogénicos de
floración, dormición y bulbificación son controlados por el fotoperíodo y la
temperatura. Controlando estos factores también es posible obtener plantas donantes
y explantos más homogéneos durante todo el año. Pueden aplicarse además
pretratamientos con reguladores de crecimiento a las plantas donantes, así como
también a los explantos mismos. En especies leñosas suele utilizarse como
pretratamiento la inmersión de los explantos primarios en soluciones con
citocininas a fin de inducir la brotación de yemas.
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