Durante esta fase se espera
que los explantes que sobrevivieron la FASE 0 y 1 originen brotes (de procedencia axilar o adventicia) con varias hojas. En la base de cada
hoja hay una yema que se desarrollará luego de ser puesta en contacto con el medio
de cultivo. Periódicamente estos nuevos
brotes se deben subcultivar en un nuevo medio mediante divisiones y resiembras
en tubos de cultivo u otros recipientes adecuados. Estas operaciones se
realizan en la cámara de flujo laminar o en un lugar aislado que nos permita
mantener las condiciones de asepsia. De esta forma aumenta el número de plantas
en cada repique o división de las plantas. El número de plantas que se obtiene
dependerá de la especie vegetal y de las condiciones del medio de cultivo. El
número de plantas que se obtiene por la vía de la micropropagación permite
alcanzar incrementos exponenciales, considerando que todos los factores que
afectan el crecimiento hayan sido optimizados.
La propagación de plantas in vitro es una técnica muy utilizada en cultivos de
importancia económica. Permite cultivar
células, tejidos, órganos,
semillas, embriones y obtener individuos selectos en forma rápida. Los
cultivos son realizados por personal
especializado en medios específicos (hormonas, minerales, vitaminas, fuente de
carbono, agente gelificante, agua, etc.) y condiciones ambientales
controladas (temperatura, humedad y luz) (Figura 5). Una vez ajustados
los protocolos para la especie o cultivo
de interés, es posible automatizar el proceso
de modo de llevarlo a mayor escala de producción. La micropropagación
(propagación clonal por cultivo in
vitro) constituye uno de los métodos biotecnológicos que mayores logros ha aportado al desarrollo de la agricultura,
ya que se la usa en la producción masiva de
especies hortícolas, aromáticas, medicinales, frutícolas, ornamentales y
forestales. Entre las ventajas de la micropropagación se pueden mencionar:
- - Posibilita incrementar rápidamente nuevos materiales.
- - Permite controlar las condiciones ambientales, debido a su independencia de los mismos (luz, temperatura y humedad controlada).
- - Permite estudiar diversos procesos fisiológicos.
- - Evita el riesgo de contaminación con patógenos, ya que se realiza en medios esterilizados.
- - Se pueden obtener gran cantidad de individuos en espacios reducidos.
- - Permite la obtención de individuos uniformes.
- - Facilita el transporte del material
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