martes, 4 de diciembre de 2012

4.2.4. VECTORES DE CLONACIÓN


Los vectores son unidades de ADN que se autoreplican en un microorganismo o células humanas y los cuales pueden portar fragmentos de ADN de origen diverso. El vector debe contar con los elementos que le permitan ser replicados y mantenidos por la maquinaria celular hospedadora. Los vectores son propagados en hospedadores que pueden ser células de E. coli, levadura (S. cerevisiae) o células mamíferas. Los vectores pueden ser estructuras sencillas como plásmidos o muy complejos como los cromosomas artificiales de levadura (YAC) y los cromosomas artificiales mamíferos (MAC). los vectores tienen diferente capacidad de portar longitudes variables de secuencias de ADN. Los cromosomas artificiales mamíferos se vislumbran como vectores de terapia genética de condiciones causada por genes mayores como el de la distrofina, cuya disfunción causa la distrofia muscular de Duchenne-Becker, gen que tiene una longitud de secuencia de 2.4 Mb.


CARACTERISTICAS IMPORTANTES DE UN VECTOR DE CLONACION PLASMIDICO:

  • n  Necesita un origen de replicación àpropagar el plasmido y mantener a nivel de 10 a 20 copias por célula.
  • n  Genes que confiere resistencia a antibióticos à permite la selección.
  • n  Varias secuencias únicas de reconocimiento para diferentes endonucleasas de restricción à generar sitios por donde se puede insertar las secuencias foráneas de DNA.
  • n  Tamaño global pequeño àfacilita la entrada del plasmido en la célula.


INFORMACION OBTENIDA DE LOS ARCHIVOS QUE PROPORCIONO EL PROFESOR DURANTE LA CLASE.

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